RCA滚环扩增试剂盒
描述：滚环扩增（rolling circle amplification，RCA）是新近发展起来的一种恒温核酸扩增方法。以环状 DNA 为模板，通过一个短的 DNA 引物（与部分环状模板互补），在 phi29DNA 聚合酶催化下将dNTPs转变成单链DNA，此单链DNA包含成百上千个重复的模板互补片段。这种方法不仅可以直接扩增 DNA 和 RNA，还可以实现对靶核酸的信号放大，灵敏度达到一个拷贝的核酸分子，因此在核酸检测中具有很大的应用价值和潜力。本试剂盒配置的 phi29 DNA 聚合酶具有链置换和连续合成特性，可连续合成长达70kb的DNA片段。另外，该酶具有 3’→5’外切酶校读功能，合成的 DNA 片段保真性高。试剂盒配备的 Random Hexamers 为 6 碱基随机引物可对目标分子进行指数放大（通常放大 10000 倍）。
2. 变性退火将上述产物置于 PCR 上，93°C 变性 3min，25°C 5min。
3. 向上述退火产物中加入 0.5μl phi29 DNA Polymerase 和0.2μl Yeast Pyrophosphatase，混合均匀后放置到 30°C 反应 2~16h（根据所需的产物量进行反应时间调整，通常分别在 2h、5h、16h 进行电泳确认）。
4. 反应结束后 65°C 10min 进行失活反应。
注意：RCA 扩增还可应用于其它缺刻或诊断相应的实验，此时Random Hexamer 为非必须品。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
好评度