TaqMan SNP Genotyping Kit
描述：ASL（Allele Specific Ligation） TaqMan PCR Genotyping Kit 是自主研发的创新型基因分型技术，使用该技术方案可快速高效的进行 SNP、插入缺失等基因分型试验，通常在 3 个小时内可完成整个工作。该方案的最大优点为 SNP分型准确、重复性高； 且不需要高纯度基因组 DNA、成本低、操作简单易懂，仅需要普通 PCR 仪和定量 PCR 仪（具备FAM/Cy5 or Hex 双通道）即可完成实验。该试剂盒适用于用于各种动植物、微生物、病毒样本的基因分型和亚型鉴定。试剂盒中的创新的 ASL Probe 修饰探针和高特异性 SNP Ligase，高效保证产物的特异性，提供绝佳的基因分型鉴定，原理如下图所示。该试剂盒为定制型产品，请提供相应的 SNP 号或突变位点序列信息，我处完成试剂盒定制的周期为 3 个工作日。
操作步骤
1. 常规 PCR 扩增，体系配置
2. 常规 PCR 扩增程序（PCR 仪）
3. 等位基因探针，杂交连接，体系配制
4. 等位基因探针，杂交连接程序（PCR 仪）
5. TaqMan 定量 PCR 扩增分型，体系配置
6. RealTime TaqMan PCR 扩增分型（定量 PCR 仪）
（1）根据所用定量 PCR 仪使用方法，设置程序为基因分型模式。
（2）在样本对话框中，对样品进行荧光标记染料FAM/Cy5（与步骤 5 使用对应）染料组合。
（3）定量 PCR 扩增程序
（4）基因分型结果分析
在基因分型窗口下进行结果查看，必要情况下可查看扩增曲线。
注意事项
(1). 常规 PCR 扩增产物，通常要求目的条带明亮，可允许有少量非特异性产物，通常比例不高于 20%。如果产物不能很好的获得扩增，a.请检查模板 DNA 质量是否达标，b.TM值可在 50~60°C 进行优化。通常我处设计的引物都可以获得理想的扩增结果，对有困难的序列区域，如高 GC、高重复，我处也可以安排重新设计合成。研究者也可以自行设计合成。产物大小要求 200~2000bp，突变位点远离引物区50bp 以上。
(2). NTC 对照样品可在步骤 3 中，不加入 PCR 扩增产物，采用 ddH2O 进行阴性反应。NTC 在定量 PCR 扩增过程中必须每一次都要加入。
(3). 对于拥有 Cy5 通道检测能力的定量 PCR 仪，我们推荐用 FAM/Cy5 探针组合。FAM/HEX 探针组合在绝大多数的定量 PCR 以上也能获得准确的基因分型结果，如果不能很好的基因分型，可能存在荧光串色问题，请联系设备供应商进行荧光矫正。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
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