虾碱性磷酸酶（Shrimp Alkaline Phosphatase,SAP)  JNC9C4901

虾碱性磷酸酶（Shrimp Alkaline Phosphatase,SAP)

描述：

虾碱性磷酸酶催化 DNA 和 RNA 的 5’和 3’磷酸单脂的去磷酸化反应，也可水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸（NTP 和 dNTP）。该磷酸酶在分子生物学研究中应用广泛，如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团，用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中，可使线性载体去磷酸化，防止自连。虾碱性磷酸酶在 65°C 温育 5 分钟即可完全的、不可逆的失活，因此，在连接或末端标记之后，可以不用去除热敏磷酸酶。基于以上特性，该酶是传统去磷酸化酶--小牛肠碱性磷酸酶（CIP）的绝佳替代物。

应用 

DNA 和 RNA 的去磷酸化 

防止克隆载体的自连 

制备 5´末端标记模板 

去除 PCR 产物中的 dNTP 和焦磷酸盐 

储存：-20℃可保存 3 年。 

活性定义：1 单位指在 25°C 条件下，30 分钟能使 1 μg 经HindIII（产生 5’突出末端）消化的 pUC19 DNA 去磷酸化所需的酶量。去磷酸化标准是指在自连接反应中能抑制＞95%的 DNA 再连接。

使用注意事项： 

（1）1×SAP Buffer：50 mM Bis-Tris HCl pH 6.0，1mMMgCl₂，0.1 mM ZnCl₂，25°C 温育。 

（2）热失活：65°C 加热 5 分钟，不可逆失活。该酶通常用于酶切载体的去磷酸化，因其不可逆热失活特性。当完成去磷酸化反应后，无需再纯化产物，可以直接用于后续连接反应。 

（3）虾碱性磷酸酶也可以用来降解 PCR 反应中的游离dNTP，用于制备测序模板和 SNP 分析。同样无需纯化，可直接用于下游实验。

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