Bst 2.0 DNA 聚合酶  JNC9A3801

Bst 2.0 DNA 聚合酶

描述：

该 酶 来 源 于 Bacillus stearothermophilus DNAPolymerase I，通过基因工程手段去除了其 5’-3’外切酶活性，而保留了 5’-3’聚合酶活性。该酶具有很强的链置换能力，因此是 Isothermal amplification (LAMP, RT-LAMP)的绝佳用酶。与野生型 Bst DNA 聚合酶（大片段）相比，该酶在扩增速度、产量、耐盐性和热稳定性等方面均有大幅提高，同时，该酶可以使用 dUTP 作为底物进行扩增(Bst 大片段无此活性)。

单位定义 

一个活力单位即在 65°C 条件下，30 分钟内催化 10 nmoldNTP 的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。

应用：DNA 等温扩增 

富含 GC 结构的快速测序 

微量模板 DNA 的快速测序 

失活：85°C，5min 失活。 

储存：-20℃可保存 3 年。

典型的 LAMP 反应

1. 按以下组分配制 LAMP 反应液

*10X Primers：16 µM FIP/BIP, 2 µM F3/B3, 4 µM LoopF/B each。 

2. 65°C 30~60min; 85°C 5min 失活。

使用注意事项：

(1) Mg ²⁺的使用浓度为 4~10 mM 浓度，Isothermo Buffer中没有 Mg ²⁺，通常情况下，在 6-8mM Mg ²⁺条件下可获得较好的 LAMP 结果。 

(2) 有文献报道加入 Tte Uvrd 解旋酶可改善 LAMP 的效果。 

(3) 使用无模板 DNA 作为对照检测扩增的特异性。

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