福尔根DNA染色液(Feulgen Stain三组分)
中文名:福尔根DNA染色液(Feulgen Stain三组分)
英文名:福尔根DNA染色液(Feulgen Stain三组分)
CAS:N/A级别:N/A
分子量:N/A分子式:N/A
纯度:N/A储存条件:4℃
产品简介
保存条件：4℃储存，有效期6个月。
包装内容：
自备材料：
蒸馏水、系列乙醇、恒温箱
产品简介：
脱氧核糖核酸(DNA)染色方法有 Feulgen 法、甲基绿-派洛宁法、吖啶橙荧光法等，其中最经典 的是 Feulgen 法，该法是一种经典的酶组织化学法。
Feulgen Stain 原理在于 DNA 经温和的弱酸(例如盐酸)水解后，嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键被 打开，并且使脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开，在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。醛基在原位与 Schiff 试剂结合，形成紫红色化合物，使细胞内含有 DNA 的部位呈紫红色。紫红色的产生是因为反 应产物的分子内有醌基(醌基是一个具有颜色的发色团，所以凡含有 DNA 的部位就呈紫红色。该水 解作用不影响核糖-嘌呤结合键，因此 RNA 用此法处理后则分解，所以该法不适用于证明 RNA。
使用方法：（仅作参考）
（一）石蜡切片染色
1. 组织固定：Carnoy 固定石蜡切片较好，10%福尔马林亦可，不宜采用 Bouin 固定液。
2. 配制弱酸工作液: 按弱酸溶液:蒸馏水=1:4 配制，即取 1 份弱酸溶液、4 份蒸馏水，充分混合，即获得弱酸工作液。
3. 石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
4. 入弱酸工作液，室温浸洗一下。
5. 切片入预热至 60℃的弱酸工作液，孵育 8min。
6. 切片入室温的弱酸工作液中冲洗 1min。
7. 蒸馏水冲洗。
8. 切片入 Schiff Reagent，室温避光染色 30~60min。
9. 在上述染色过程中，配制 SO2 水工作液。按弱酸溶液:亚硫酸盐溶液:蒸馏水=1:5:94 配制， 即取弱酸溶液 1 份、亚硫酸盐溶液 5 份、蒸馏水 94 份，充分混合，即配即用。
10. 用新鲜配制的 SO2 水工作液洗切片 3 次，每次 90s。
11. 蒸馏水中洗净。经系列乙醇脱水。二甲苯透明并封片。
（二）冰冻切片染色
1. 冰冻切片预处理：取 1 份乙酸、3 份无水乙醇混合即为固定液，固定 10min。
2. 由无水乙醇脱水--逐级下行—蒸馏水。
3. 配制弱酸工作液：按弱酸溶液:蒸馏水=1:4 配制，即取 1 份弱酸溶液、4 份蒸馏水，充分 混合，即获得弱酸工作液。
4. 余下步骤同上述石蜡切片染色。
染色结果：
细胞核内DNA： 红紫色
阴性对照：
将同样切片经上述步骤， 只有步骤5 改为入室温弱酸工作液，孵育15min。 结果为细胞核DNA 阴性。
注意事项：
1.水解时间很重要，并且应使用恰当的固定时间。不同的固定液水解时间不一样。
2.注意Schiff Reagent 的纯净程度，若变浅粉红亦可考虑使用，颜色变红则弃用。
3.去除切片上多余Schiff Reagent 的方法以SO2水洗为好。
4.应做阴性对照试验。
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