33258 荧光染料
中文名:33258 荧光染料
英文名:Hoechst 33258
CAS:23491-45-4级别:Reagent Grade
分子量:533.88分子式:C25H27Cl3N6O
纯度: ≥98% (HPLC)储存条件:−20°C
产品简介
中文别名：赫斯特荧光燃料，33258;甲嗪双苯咪酚
英文别名：33258hoechs
物理性质：H2O: soluble10 mg/mL , water and ethanol: soluble10 mg/mL ,phosphate buffer: precipitates
产品用途：Hoechst 33258的最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm；Hoechst 33258和双链DNA结合后，最大激发波长为352nm，最大发射波长为461nm。细胞遗传学研究的常用试剂，荧光染色细胞的DNA ，插入DNA的A-T区,具有低的细胞毒性,形成膜渗透性荧光DNA链
使用说明：
1. 对于固定的细胞或组织：
a. 对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33258染色。
b. 对于贴壁细胞或组织切片，加入少量Hoechst 33258染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。
c. 吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。
d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。
2. 对于活细胞或培养的组织：
a. 加入适当量Hoechst 33258染色液，必须充分覆盖住待染色的样品，通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液，对于96孔板一个孔需加入100微升染色液。
b. 在适宜于细胞培养的温度培养20-30分钟。弃染色液，用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。细胞发生凋亡时，在荧光显微镜下观察会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。
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