NerveRedTM C2（FM4-64）
中文名:NerveRedTM C2（FM4-64）
英文名:NerveRedTM C2（FM4-64）
CAS:N/A级别:N/A
分子量:607.51分子式:C30H45Br2N3
纯度:N/A储存条件:-20°C
产品简介
神经末梢探针是一系列阳离子型苯乙烯基荧光染料，用于跟踪神经肌肉连接或突触的突触活动。这类染料通常具有亲脂性尾部（两个碳链）和带阳离子的高亲水性头部。NerveRed 系列探针是具有三个双键的染料。
阳离子苯乙烯基染料是通过活性依赖性染色突触小泡来发挥功能。染料与细胞或组织共孵育时，染料的水相部分没有荧光，而染料的亲脂性尾部插入细胞膜并呈现强荧光。神经刺激后，在进行胞吞作用时，染料被包裹在囊泡内，因此，洗去细胞表面附着的染料后，荧光信号强弱表示新形成的囊泡的数量的多少。反之，在胞吐作用时，染料与神经递质一起从囊泡释放，导致荧光信号减少。因此，荧光强度的变化反映了胞吞/胞吐或突触活动的情况。内吞过程中荧光增加的速率——“结合速率”和胞吐过程中荧光减少的速率——“解离速率”因染料种类而异。通常，具有较长亲脂性尾部和更多双键的染料对膜具有较高的亲和力，因此具有较高的结合速率和较低的解离速率。
NerveRedTM C2 染料不能用于固定细胞染色，固定细胞的染色可选择 NM 系列染料。
实验操作：
以下是盖玻片上培养的神经元细胞的神经末梢染色方案。
神经末梢染料也可用于标记非神经元细胞类型的内吞囊泡。染色可以在 4℃进行以选择性标记质膜; 在室温或37℃下，染料的内吞通常在 10 min 内发生。可以使用 Tyrode 溶液或其它缓冲液，可选择性添加钠离子通道阻断剂河豚毒素（TTX），其目的是阻断动作电位，防止染色后的突触囊泡释放。用于特定实验的最佳方案需要由实验者摸索。
1. 在 50 mM Tyrode 溶液中稀释神经末梢染料至最终浓度为4 μM。在室温下将含有细胞的盖玻片置于该溶液中 1 min，使细胞完全浸没。
2. 将盖玻片转移至 Tyrode + 0.5 μM 河豚毒素（TTX）溶液中，室温下孵育 1 min。
3. 室温下，用 Tyrode + 0.5 μM TTX 溶液反复多次洗涤盖玻片。
4. 荧光显微镜下拍照观察。
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