一管式双链cDNA合成试剂盒
产品及特点 本产品是用于一管式双链 cDNA 合成的试剂盒。cDNA 第一链合成的原理 是以 Oligo dT 为通用引物的、MMLV 催化的逆转录反应。其原理如下: cDNA 第二链合成的原理是用 RNase H 使 RNA-DNA 杂合链中的 RNA 产生切口,再用 DNA Polymerase I 通过切口平移(nick translation)反应进 行 RNA 链取代合成 cDNA 第二链,其原理图如下:
cDNA 第二链合成的原理是用 RNase H 使 RNA-DNA 杂合链中的 RNA产生切口,再用 DNA Polymerase I 通过切口平移(nick translation)反应进行 RNA 链取代合成 cDNA 第二链,其原理图如下:
本产品具有下列特点:
1. 即开即用,含有合成两条 cDNA 链的所有试剂。
2. 一管式进行,第一链 cDNA 合成后不需要任何处理,直接进入第二链 的合成。
3. 所得双链 cDNA 可以直接用于后续的常规 PCR、real-time PCR、 cDNA 文库构建、抑制性差减杂交等。
4. 本试剂盒足够 10 次 80uL 体系的双链 cDNA 合成反应。
规格及成分
运输及保存 低温运输,-20℃保存,有效期一年。
自备试剂 mRNA 提取试剂盒
使用方法
一:mRNA 的制备
本试剂盒不提供 mRNA 提取试剂,用户需自备相关试剂。
二:双链 cDNA 的合成
1. 在一个干净的塑料离心管中,按下表设置 cDNA 合成反应:
2. 电泳 5uL 检测 cDNA 质量。如果 cDNA 在 0.5-10Kb 的范围内呈模糊一 片,则 cDNA 合格。如果没看见 cDNA 或有其他异常,需查找原因后再 继续。
3. 所得 cDNA 可以直接用于后续的常规 PCR、real-time PCR、cDNA 文 库构建、抑制性差减杂交等实验。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
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