2×GS Taq Master Mix
产品组成
| 组分 | 规格 |
| 2×GS Taq Master Mix | 5×1.0 mL |
保存条件
-20℃保存 24 个月。
产品简介
本产品包含 Taq DNA Polymerase、dNTPs 以及优化的缓冲体系，浓度为 2×， 只需要添加引物、模板和 ddH2O 即可进行 PCR 扩增。本产品相对于普通 Taq PCR Mix 具有更高的产量及扩增性能，可有效扩增 5 kb 以内的 DNA 片段。体系中包含有蓝色电泳指示剂，可在扩增完成后直接上样进行电泳检测，其迁移速度在 1% TAE 琼脂糖凝胶中与 500 bp 双链 DNA 片段相近。
使用本产品扩增的产物是混合末端，纯化后可用于平末端克隆，也可用于黏末端克隆。
产品特点
操作简单：2×Mix，只需要添加引物、模板和 ddH2O 即可进行 PCR 扩增；
产量高：相对普通 Taq PCR Mix 具有更高的产量；
耐受性好：对抑制物有较好的耐受度；
适用性广：对多种模板均有良好的扩增性能。
适用范围
适用于常规 PCR 扩增。
注意事项
1. PCR Mix 应避免反复冻融，短期内多次使用可置于 4℃保存；
2. 当产物产量较低时，可通过增加延伸时间或循环数来改善；
3. 本产品不可用于细菌 16S 鉴定。
使用方法
操作示例
按下表配制 PCR 反应体系（冰上操作）
| 组分 | 25 μL 体系 | 50 μL 体系 | 终浓度 |
2×GS Taq PCR Master Mix | 12.5 μL | 25 μL | 1× |
| Primer 1 (10 μM)a | 1.0 μL | 2.0 μL | 0.4 μM |
| Primer 2 (10 μM)a | 1.0 μL | 2.0 μL | 0.4 μM |
| Template DNAb | As require | As require | |
| ddH2O | Up to 25 μL | Up to 50 μL |
a. 引物：扩增效果较差时，可在 0.2~0.8 μM 范围内调整引物终浓度；
b. 模板推荐量：
基因组 DNA：10~1000 ng；
质粒 DNA：0.1~30 ng；
cDNA：1~2 μL(不超过 PCR 反应总体积的 1/10)。
建议的 PCR 条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 3 min | 1 |
| 变性 | 94℃ | 30 s | 30~35 cycles |
| 退火 a | 55~64℃ | 30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 30 s/kb | |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
| - | 4℃ | Hold | - |
a. 退火温度：参考引物 Tm 值，若上下游引物 Tm 相近，建议退火温度设置为引物中 Tm 较小值+3~5℃；若上下游引物 Tm 相差较大，建议退火温度设置为引物 Tm 的中间值；亦可采用梯度退火温度，筛选最适温度。
常见问题与解决办法
Q1：扩增无产物或产物量少？
A1：
1) 模板降解或模板纯度差。电泳检测模板质量，使用高质量模板；
2) 模板浓度过低。适当增加模板用量；
3) 引物不合适。优化引物设计；
4) 退火温度不合适。设置退火温度梯度，摸索合适的退火温度；
5) 循环数过少。适当增加 5~10 个循环；
6) 延伸时间不足。复杂模板可适当增加延伸速度至 20~30 s/kb。
Q2：扩增出现非特异条带或弥散带？
A2：
1) 引物特异性差。优化引物，避免非特异性条带以及引物二聚体的扩增；
2) 引物浓度过高。降低引物浓度；
3) 模板过量或纯度差。减少模板量，使用高质量模板；
4) 退火温度过低。适当提高退火温度或使用 Touchdown PCR 程序；
5) 循环数过多。减少循环数至 25~30 cycles。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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