2×GS Antitaq PCR Mix
产品组成
| 组分 | 规格 |
| 2×GS Antitaq PCR Mix | 5×1.0 mL |
保存条件
-20℃保存 24 个月。
产品简介
本产品包含抗体修饰的热启动GS Antitaq DNA聚合酶、dNTPs以及优化的缓冲体系，浓度为2×， 只需要添加引物、模板和ddH2O即可进行PCR扩增。
使用本产品扩增的PCR产物3’端带有一个突出的"A"碱基，纯化后可直接用于TA克隆。
产品特点
操作简单：2×Mix，只需要添加引物、模板和ddH2O即可进行PCR扩增；
适用范围
适用于常规PCR、热启动PCR。
注意事项
1. 请使用高质量的模板进行扩增；
2. PCR Mix应避免反复冻融，短期内多次使用可置于4℃保存。
使用方法
操作示例
按下表配制 PCR 反应体系（冰上操作）
| 组分 | 25 μL 体系 | 50 μL 体系 | 终浓度 |
2×GS Antitaq PCR Mix | 12.5 μL | 25 μL | 1× |
| Primer 1 (10 μM) | 0.5 μL | 1.0 μL | 0.2 μM |
| Primer 2 (10 μM) | 0.5 μ | 1.0 μL | 0.2 μM |
| Template DNA* | As require | As require | |
| ddH2O | Up to 25 μL | Up to 50 μL |
*模板推荐量：
基因组DNA：10~1000 ng；
质粒DNA：1~30 ng；
cDNA：1~2 μL(不超过PCR反应总体积的1/10)。
（以上为推荐的模板使用量，实际反应条件因模板、引物等的结构不同会存在一些差异，可根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件，并根据比例放大或缩小反应体系。）
建议的 PCR 条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 2~5 min | 1 |
| 变性 | 94℃ | 30 s | 30~35 cycles |
| 退火 | 50~68℃ | 30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 1~2 kb/min | |
| 终延伸 | 72℃ | 5~10 min | 1 |
| - | 4℃ | Hold | - |
常见问题与解决办法
Q1：扩增无产物或产物量少？
A1：
1) 模板降解或模板纯度差。电泳检测模板质量，使用高质量模板；
2) 模板浓度过低。适当增加模板用量；
3) 引物不合适。优化引物设计；
4) 退火温度不合适。设置退火温度梯度，摸索合适的退火温度；
5) 循环数过少。适当增加 5~10 个循环；
6) 延伸时间不足。复杂模板可适当增加延伸速度至 20~30 s/kb。
Q2：扩增出现非特异条带或弥散带？
A2：
1) 引物特异性差。优化引物，避免非特异性条带以及引物二聚体的扩增；
2) 引物浓度过高。降低引物浓度；
3) 模板过量或纯度差。减少模板量，使用高质量模板；
4) 退火温度过低。适当提高退火温度或使用 Touchdown PCR 程序；
5) 循环数过多。减少循环数至 25~30 cycles。
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