六胺银染色液(改良Grocott-橙黄G法)
产品简介：
六胺银染色液是一种经典显示基底膜的方法。经过Grocott改良之后,组织经铬酸氧化，使真菌内的黏多糖暴露出醛基，醛基把六胺银还原为黑色的金属银。氯化金可使金属银转变为更稳定的金属金，同时使背景更清晰。海波可以固定并洗去未还原的银离子。
本法采用橙黄G复染对各种真菌的显示效果都很好，特别是马尔尼菲青霉菌的显示特别好，但必须淡染橙黄G。如需显示曲霉和白色念珠菌，可选用苏木素或者伊红复染，可看到真菌与周围组织的关系。
产品组成：
编号 名称 | JNC90101DM 5×50ml | Storage | |
试剂(A): 氧化剂 | 50ml | RT 避光 | |
试剂(B): 漂白剂 | 50ml | RT | |
试剂(C):六胺银工作液 | C1:六胺银原液 | 25ml | 4℃ 避光 |
C2:硼酸钠溶液 | 25ml | RT | |
临用前，C1、C2等量混合即为六胺银工作液，即配即用。 | |||
试剂(D): 氯化金溶液 | 50ml | 4℃ 避光 | |
试剂(E): 海波溶液 | 50ml | RT | |
试剂(F): 橙黄G复染液 | 10ml | RT | |
使用说明书 | 1份 | ||
自备材料：
1、蒸馏水、系列乙醇、封片剂
2、水浴锅或恒温箱
操作步骤(仅供参考)：
1、组织固定于中性甲醛固定液，常规脱水包埋，切片4～5μm，脱蜡至水洗。
2、切片入氧化剂氧化20min，流水稍洗。
3、入漂白剂处理1min，以除去氧化剂。
4、流水冲洗5min，蒸馏水浸洗2次，每次30～60s。
5、切片放入配制好的预热至60℃六胺银工作液中，加盖60℃恒温染色大约20～60min，切片呈淡黄色即取出经水洗后显微镜观察有否有菌体出现。如有淡棕色菌体出现，应每隔5～10min观察一次以控制菌体着色深浅，直至显色理想。
6、入蒸馏水清洗。
7、用氯化金溶液调色1～2min，蒸馏水洗1～2 min。
8、置于海波溶液2 min，流水冲洗5min。
9、滴加1滴橙黄G复染液复染1 s，流水冲洗。染色时间不宜过长，否则将影响最终效果。
10、流水冲洗20～60s。
11、常规脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果：
真菌、上皮粘液 | 黑色或棕黑色 |
背景 | 橙黄色 |
注意事项：
1、实验中所用玻璃器皿，应预先用硫酸洗液浸泡并用蒸馏水冲洗干净、烤干。
2、六胺银工作液配制后应先放入温箱中预热，温度要达到60℃时，再放人切片进行染色；如用水浴锅代替恒温箱，需将温度设定在48~50℃，否则切片会很快变黑而难以掌握，一般建议在恒温箱中孵育染色。
3、在低倍镜检时菌体不宜着色太黑，否则在高倍镜下观察则不够清晰透亮，特别需注意菌体成堆的地方的显色。
4、配制好的六胺银工作液是一次性的，不宜久置。
5、氯化金调色时一 定要在显微镜下观察。
6、橙黄G复染液应淡染，时间不能过长。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 6个月有效。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
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