本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,操作简单方便,1 h内可完成单个样本的抽提工作。离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
推荐使用量及产量:高拷贝质粒推荐使用量150-300 mL,得率可多达0.2-1.5 mg左右;低拷贝质粒或大于10 kb的大质粒,应适当加大菌体量,同时按比例增加P1、P2、N3的用量,其它步骤相同。
注意事项
请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项
◇ 所有离心操作步骤,均在室温(15-25℃)下进行。
◇ 首次使用时,将试剂盒所带的全部RNase A加入溶液P1后(终浓度100 μg/mL)置于4℃保存。如果溶液P1中RNase A失活,提取的质粒可能会有微量RNA残留,在溶液P1中补加RNase A即可。
◇ 首次使用前请先在漂洗液WB瓶中加入指定量无水乙醇,充分混匀,加入后请及时在方框打钩标记已加入无水乙醇,以免多次加入!
◇ 环境温度低时溶液P2中SDS可能会析出浑浊或者沉淀,可在37℃水浴加热帮助溶解,不要剧烈摇晃,以免形成过量的泡沫
◇ 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧瓶盖。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
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