本试剂盒适用于快速提取各种动物全血基因组DNA,可在1 h内完成单个或多个样本的提取工作。本试剂盒根据全血特点采用几个快速步骤提取基因组DNA。首先红细胞裂解液裂解去除不含DNA的红细胞,细胞核裂解液裂解白细胞释放出基因组DNA,然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白,最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。不同样品尤其疾病样品中中白细胞数量差异可能非常大,因此产量的个体差异也可能非常大。
不同样本量的全血提取DNA的大致产量与纯度如下:
样本类型 | 样本量 | DNA平均产量 | 纯度 |
人类全血 | 300 μL | 3-10 μg | 1.7-1.9 |
1 mL | 4-30 μg | 1.7-1.9 | |
3 mL | 75-150μg | 1.7-1.9 | |
5 mL | 100-200 μg | 1.7-1.9 | |
10 mL | 200-400 μg | 1.7-1.9 |
注:根据血液样品中白细胞数量和保存条件的差异,DNA产量也会有所差异。
注意事项
请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项
◇ 所有离心操作步骤,均在室温(15-25℃)下进行。
◇ 环境温度低时细胞核裂解液中某些去污剂成份会析出沉淀,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清,不要剧烈摇晃,以免形成过量的泡沫。蛋白沉淀液可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,如果不能完全溶解,也不影响使用效果,直接取用上层溶液即可。
◇ 本试剂盒可运用于多种抗凝剂的全血,如EDTA、柠檬酸、肝素抗凝血。其中由于肝素抗凝血的白细胞沉淀团很难打散重悬,影响裂解效果,建议选用非肝素的抗凝剂收集血液标本。
◇ 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧瓶盖。
◇ 为了最佳效果,最好使用新鲜血液标本或者4℃存放少于3天的标本,不要使用反复冻融超过3次的标本,否则会严重降低产量。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
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