许多高温DNA聚合酶,如Taq DNA聚合酶、Tth DNA聚合酶等扩增的PCR产物在3'末端后都带有一个突出的碱基A,这样的PCR产物可以用3'末端后带有一个突出碱基T的载体进行克隆。 pBLUE-T载体来源于pBlueScript II SK(+)质粒,在EcoR I酶切位点处添加了适当序列,经XCM I酶切后其3'末端直接产生未配对的T碱基,因此有更高的重组效率。 pBLUE-T载体插入位点两端独特设计的两个EcoR I位点使插入片段可以用廉价高效的EcoR I单酶切检测;同时 pBLUE-T载体不含Nde I或Nco I限制性内切酶位点,可方便用于克隆含上述酶切位点的基因。此外,载体连接体系还有背景低(蓝斑小于10%)、重组率高(白斑中超过90%有插入片段)、可快速连接等特点。本说明书未列出 pBLUE-T载体相关的技术资料,其全序列可参照pBlueScript II SK(+)序列,只是其多克隆酶切位点处序列稍有不同。
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