该产品基于无苯酚、氯仿RNA快速提取技术,以及基因组DNA清除柱技术(而非DNase消化),确保有效清除gDNA残留,得到的RNA可直接用于PCR、荧光定量PCR等实验。
该试剂盒内独特的裂解液迅速裂解细胞并灭活细胞RNA酶,裂解混合物通过基因组DNA清除柱,基因组DNA被清除而RNA穿透滤过。然后用乙醇调节结合条件后,总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的去蛋白、漂洗的步骤将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的RNase Free H2O将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。该产品可在20 min内完成单个样品RNA的提取,提取的总RNA完整性好,无蛋白和基因组DNA污染。
不同样本提取RNA的大致产量与纯度如下:
样本类型 | 样本量 | RNA平均产量 | 纯度 |
胚胎(13天) | 20 mg | 22-28 μg | 1.8-2.0 |
肾脏 | 15 mg | 29-35 μg | 1.8-2.0 |
肝脏 | 10 mg | 50 μg | 1.8-2.0 |
脾 | 15 mg | 32-35 μg | 1.8-2.0 |
胸腺 | 10 mg | 40-45 μg | 1.8-2.0 |
肺 | 20 mg | 18-22 μg | 1.8-2.0 |
注意事项
请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项
◇ 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量无水乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
◇ 样品处理量不要超过基因组DNA清除柱和RNA吸附柱RA处理能力,否则造成DNA残留或者产量降低。不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大,例如胸腺、脾脏DNA含量丰富,超过5 mg就会超过DNA清除柱处理能力。COS细胞RNA含量丰富,超过3×106细胞就会超过RNA吸附柱RA吸附能力。
◇ 裂解液RLT Plus和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
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