该产品基于无苯酚、氯仿RNA快速提取技术,以及基因组DNA清除柱技术(而非DNase消化),确保有效清除gDNA残留,得到的RNA可直接用于PCR、荧光定量PCR等实验。
该试剂盒内独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,离心沉淀去除多糖多酚和次级代谢产物,然后裂解混合物用乙醇调节RNA结合到基因组DNA清除柱上,RNA被选择性洗脱滤过,DNA吸附在基因组DNA清除柱上而被清除。然后用乙醇调节结合条件后,总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的去蛋白、漂洗的步骤将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的RNase Free H2O将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。该产品可在50 min内完成样品RNA的提取,提取的总RNA完整性好,无蛋白和基因组DNA污染。
不同样本提取RNA的大致产量与纯度如下:
样本类型 | 样本量 | RNA平均产量 | 纯度 |
香蕉果肉 | 100 mg | 3-5 μg | 1.8-2.0 |
西瓜果肉 | 100 mg | 1.5-2.4 μg | 1.8-2.0 |
苹果、梨果肉 | 100 mg | 1.2-2 μg | 1.8-2.0 |
红薯块茎 | 100 mg | 5.5-9 μg | 1.8-2.0 |
马铃薯块茎 | 100 mg | 6-10 μg | 1.8-2.0 |
白松松针 | 100 mg | 15-20 μg | 1.8-2.0 |
棉花叶片 | 100 mg | 20-25 μg | 1.8-2.0 |
月季叶片 | 100 mg | 20-25 ug | 1.8-2.0 |
枇杷叶片 | 100 mg | 8-10 ug | 1.8-2.0 |
水稻叶片 | 100 mg | 20-25 ug | 1.8-2.0 |
注意事项
请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项
◇第一次使用前请先在漂洗液RW瓶中加入指定量无水乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
◇裂解液CLB和RLT Plus和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
◇所有离心操作步骤,均在室温(15-25℃)下进行。
◇ 取1 mL裂解液CLB至离心管内(如果CLB有析出或者沉淀需先置于65℃水浴重新溶解),在裂解液CLB中加入5% β-巯基乙醇(1 mL CLB加50 μL β-巯基乙醇)。颠倒混匀后65℃水浴中预热。多个样品按照比例放大准备。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
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