Enterokinase

储存温度：

Enterokinase(10 U/μl)长期储存于-80℃，可保存2年；或小量分装后保存于-20℃，可保存6个月，避免反复冻融。10× EK Buffer置于-20℃保存即可。

产品介绍：

肠激酶是一种高纯度的重组牛肠激酶。该酶经多步纯化，纯度高，特异性高，并且不含其他蛋白酶。肠激酶（EC3.4.21.9）是一个特定的蛋白酶，它可以切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点：天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-赖氨酸。肠激酶可去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合标签。本公司肠激酶是自毕氏酵母表达经亲和和离子等纯化的带有多聚组氨酸标签的重组蛋白酶。

酶活性单位定义：

1 U定义为在25℃,12 h~16 h之内，将0.5 mg融合蛋白在25 mM Tris-HCl（pH8.0）缓冲液中的切割95%所需的酶量。

操作方法：

  若蛋白为热不稳定性，请在4°C孵育较长时间或增加酶的用量。

      1. 在EP管中配置如下反应体系：

   2. 混匀上述体系后于30℃孵育，在 1、2、4、6小时分别吸出30 μl上述反应液，置于单独的EP管中。

     3.  向上述EP管中加入20 μl 2×SDS Loading Buffer, 置于-20°C。

     4. 取30 μl样品进行SDA-PAGE分析。

注意事项：

  咪唑含量在100mM以下，NaCl浓度在50 mM以下，甘油浓度小于5%以下进行酶切，否则将影响酶切活性。