BCA 蛋白定量试剂盒

保存条件：本产品收到后按照上面指示温度存放各成份，至少一年内有效。蛋白标准-20℃长期保存，常温运输。

产品介绍：

  BCA(bicinchoninic acid)法蛋白浓度定量试剂盒是常用的蛋白浓度检测方法之一BCA法基础上改进而成。原理是在碱性的条件下，蛋白质中的肽键能将Cu²⁺还原成Cu¹⁺（双缩脲反应），且Cu²⁺的还原量与总蛋白量成正比，生成的Cu¹⁺和独特的BCA Solution A（含有BCA）相互作用形成紫色复合物。两分子的BCA螯合一个铜离子形成复合物，该水溶性的复合物在562nm处显示强烈的吸光性，吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有良好的线性关系，因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度。

产品特点：

1.操作简单，45min内完成测定，比经典Lowry法快4倍而且更加方便。

2.灵敏度高，检测浓度下限达到25μg/ml，最小检测蛋白量达到0.5μg，待测样品体积为1-20μl。

3.BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的去污剂等化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20，60，80。

4.在20-2000μg/ml浓度范围内有良好的线性关系。

 5.在测定范围内有较好的线性关系，变异系数小。

注意事项：

  1.蛋白标准请在全部溶解后先混匀，再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。标准品曲线配制时，如果吸量不准确或者加样枪不精确会造成标准曲线相关系数减小，可根据需要使用倍比梯度稀释的方法来配制，或者使用精确度高的加样枪。

  2.Solution A和Solution B混合成工作液时可能会出现浑浊，但充分振荡混匀后就会消失，成为淡绿色的透明溶液。

  3.酶标仪的测定波长为540-590nm之间，562nm最佳；需96孔板。如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但是测定蛋白浓度时，需根据测定吸光度的杯子的体积，按比例调整A液，B液和样品的体积。使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂  盒可以测定的样品数量可能会显著减少。

 4.BCA蛋白定量试剂盒受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保无EDTA， EDTA低于10mM，二硫苏糖醇低于1mM，β-巯基乙醇低于1mM。不适用BCA法时建议使用Bradford法蛋白定量试剂盒。还可以考虑用超纯水稀释，透析/除盐，ACETONE/TCA沉淀  蛋白后重溶于超纯水等方法来消除干扰物质的影响。

 5.为了加快BCA法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热，但是切勿过热。

 6.如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景，请试用Bradford法蛋白定量试剂盒。