DNase I 溶液（适用于蛋白以及细胞实验）JNC92076

DNase I 溶液（适用于蛋白以及细胞实验）

中文名:DNase I 溶液（适用于蛋白以及细胞实验）

英文名:Dnase I solution

CAS:N/A级别:N/A

分子量:N/A分子式:N/A

纯度:N/A储存条件:−20°

产品简介

规格：1mL/5mL（10kU/50kU）

保存条件：-20度保存，有效期2年。

产品简介：

1：DNaseI 是一种需二价阳离子的脱氧核糖核酸内切酶，可用于降解单链或双链 DNA。其原理为 DNaseⅠ水解磷酸二酯键产生带有 5'-磷酸基团和 3'-OH 的单核苷酸或寡核苷酸。Mg2+或 Mn2+都可以激活 DNaseI 的活性，而 Ca2+浓度直接影响酶的活性。Mg2+存在时可在双链 DNA 的每条单链上随机地产生切口；而在 Mn2+存在下可使双链 DNA 断裂，使DNA 片段化。

2：本产品经检测含RNase A污染，不适用于RNA样品中基因组DNA的去除。

3：适用于从原代细胞分离液中去除DNA，在降低粘度的同时提高产量。

4：适用于从蛋白质样品中除去 DNA。

5：如需要进行RNA样品中DNA污染的去除，请选用DNase I，RNase-free（Cat：SL20761）。

组分说明：

使用说明（仅供参考）：

1：用于蛋白提取

1）1mL蛋白提取液中加入DNase I溶液2μL（使其终浓度为20U/mL），然后加入100μL的10×Reaction Buffer (with MgCl2)，37℃处理30-60分钟。

   注：由于EDTA能螯合酶活性需要的Ca2+和Mg2+，蛋白初始裂解液中要去除EDTA，否则会降低DNase的消化能力。

2）继续后续蛋白提取实验。

2：用于悬浮细胞成簇/成团

1）将细胞离心，小心吸弃上清。

2）取适当培养基或者PBS缓冲液重悬细胞，向细胞悬液中加入DNase I溶液（使其终浓度为200U/mL），室温（15-25℃）处理15分钟。

3）如果细胞仍然出现细胞团块，可将样本用40μm的滤网滤到一个新的离心管中，用含有2% FBS的细胞培养基或缓冲液冲洗装样本的试管三次并将冲洗液用滤网过滤至新的离心管中。

4）细胞悬液可用于细胞计数或细胞分选等的下游应用。

5）注意：如果下游应用对DNase敏感（如造血细胞集落实验），可在进行下游实验前用相应的实验缓冲液（不含DNase）洗细胞一次。

3：用于其他实验

请根据需要配置所需浓度的DNase I，如需终止反应，加入适量200 mM EDTA进行终止反应。