PCR产物回收试剂盒
中文名:PCR产物回收试剂盒
英文名:PCR DNA Recovery Kit
CAS:N/A级别:N/A
分子量:N/A分子式:N/A
纯度:N/A储存条件:RT
产品简介
本试剂盒适用于从PCR产物中回收50bp-20kb大小DNA片段。其原理是利用结合液纯化PCR 产物，然后使用特殊材质制成的吸附柱高效特异的吸附DNA片段，再用TE Buffer或灭菌去离子水洗脱DNA片段。一般可在30分钟内完成操作。本试剂盒的吸附柱的最大吸附量可达40 µg ，DNA回收效率高达85%以上（片段过小或过大回收率会有所降低），回收的DNA片段纯度较高，可直接用后续的各种酶促反应、DNA连接、DNA测序等。
操作步骤：
1. 在PCR产物中加入约3倍体积的结合液，颠倒混匀。
2. 将混合液加入吸附柱中，室温静置2分钟（特别重要），12,000转/分 离心30秒，弃去收集管中液体。
3. 向吸附柱中加入500-600 µl洗涤液，12,000转/分 离心 30秒，弃去收集管中液体。重复此步骤一次。
4. 再于12,000转/分 离心1分钟以甩干乙醇，或置于50℃烘箱彻底烘干。将吸附柱转移至1.5 ml离心管中。
5. 加入预热65℃-100℃ TE Buffer或灭菌去离子水（pH值7.5-8.0）30-50 µl静置2分钟，12,000转/分 离心2分钟，离心管内的液体即含有目的DNA片段。
DNA浓度及纯度检测：
可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度和纯度。DNA在OD260处有显著吸收峰，OD260 值为1相当于50µg/ml双链DNA，40µg/ml单链DNA。OD260 /OD280 比值应为1.7-1.9，如用去离子水洗脱，比值会偏低，但不表示纯度低。
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