血液基因组DNA快速提取试剂盒 JNC9261

血液基因组DNA快速提取试剂盒

中文名:血液基因组DNA快速提取试剂盒

英文名:Blood gDNA Extract Kit

CAS:N/A级别:N/A

分子量:N/A分子式:N/A

纯度:N/A储存条件:RT

产品简介

（一）红细胞裂解：

1. 不同样品处理方法

a. 哺乳动物： 血液使用量以 300μL 以下为宜，使用量越大产量越高，但产率会降低。如果血液多于 300μL，重复步骤2-3两次可以提高产率。 

b. 禽类动物： 血液使用量以 20μL 以下为宜，可以从（二）DNA提取步骤开始。

2. 在 0.02-1 mL 新鲜或抗凝血液（冷冻血需先 37℃水浴融化）中加入 0.5 mL裂解液I（红细胞），充分吹打混匀。

注意：裂解液I（红细胞）容易长菌，取用需要在无菌条件下进行，用完长期保存建议高压灭菌后保存。

3. 室温12,000 rpm 离心 5 分钟，沉淀呈粉红色，小心吸弃上清。再短暂离心半分钟吸弃残留液体。

（二）DNA提取：

1. 向有沉淀的离心管内加入 0.5 mL DNA提取液（提取液有少量晶体沉淀，用前需37℃水浴溶解），用移液枪吹打使沉淀充分悬浮起来。充分吹打有助于提高DNA的得率。

2.  静置 2 分钟待溶液变清亮。

（三）基因组DNA收集：

1. 将步骤（二）所得清亮裂解液，转移到离心吸附柱中并静置2-5分钟后，12,000 rpm离心半分钟，弃穿透液。

2. 在吸附柱中加入500 μL洗涤液，12,000 rpm离心1 min，弃穿透液。重复洗涤步骤一次。

3. 再将吸附柱12,000 rpm离心30 s以甩干乙醇。

4. 将吸附柱放入一个干净的1.5 mL离心管中。在吸附柱中央加入50 μL洗脱液（65-70℃预热），室温静置2 min。12,000 rpm离心2 min。将穿透液重新加入吸附柱中央，12,000 rpm离心1 min以洗脱更多基因组DNA。

5. 检测DNA质量。将所得的基因组DNA保存于-20ºC冰箱。