2×KOD MasterMix(无染料) JNC92651

2×KOD MasterMix(无染料)

中文名:2×KOD MasterMix(无染料)

英文名:2×KOD MasterMix(Without dye)

CAS:N/A级别:N/A

分子量:N/A分子式:N/A

纯度:N/A储存条件:-20°C

产品简介

    KOD聚合酶融合SSB基因改造后，连接表达载体在大肠杆菌中经诱导表达分离纯化而来。具有5'→3'聚合酶活性和3'→5' 外切核酸酶活性，能校对DNA扩增过程中产生的碱基错配。改造后保真度更高，扩增速度更快。同时对PCR抑制剂有较高的耐受性，比如可以在含20%血液中扩出基因，KOD 聚合酶延伸速度是于Taq DNA Polymerase 6倍。PCR产物为平端，可直接克隆于平滑末端的载体中，也可用Taq聚合酶加A处理再与T载体连接。适合于扩增保真度要求较高的片段，一般为6kb/min，扩增长度可以达到20kb。保真性是普通taq酶的150倍。

注意：不含染料的Mix要补加Loading buffer。

为克服低效率扩增或不扩增，以下意见可供参考：

1. 优化退火温度。一般TM值减5℃，高于60℃以上建议使用60℃；减少反应过程中的扩增抑制剂。DNA模板中可能含有扩增抑制剂，减少模板的量提高扩增效率或提纯模板DNA的纯度。

2. 减少反应过程中的扩增抑制剂。DNA模板中可能含有扩增抑制剂，减少反应体系中模板的量提高扩增效率。

3. 提高模板DNA的纯度和浓度。

4. 增加添加物。添加PCR增强剂(如DMSO 或Btaine)可以提高扩增效率，添加稳定剂（如BSA）能帮助克服扩增失败。

产品用途：高保真PCR扩增、平末端克隆、定点突变、复杂模板扩增、高GC模板扩增、血液直扩等