KOD DNA聚合酶
中文名:KOD DNA聚合酶
英文名:KOD DNA polymerase
CAS:N/A级别:N/A
分子量:N/A分子式:N/A
纯度:N/A储存条件:-20°C
产品简介
KOD DNA Polymerase 是从克隆有 Thermococcus Kodakaraensis DNA 聚合酶基因的质粒在大肠杆菌中经诱导表达分离纯化而来。该酶所具有的超强 3’→ 5’外切酶活性使得其扩增保真性比Pfu DNA Polymerase 更高,保真性是 Taq 的约 50 倍,同时具有合成速度快的特点,聚合速度约为普通 Pfu DNA Polymerase 的 5 倍,Taq DNA Polymerase 的 2 倍,达到 100-138bp/秒,可以在短时间内获得高产量的扩增产物,特别适合于高保真地扩增 6kb 以内的 PCR 产物,扩增所得的 DNA 为平末端,可用于基因克隆、表达及突变分析等分子生物学实验。
产品内容:
Components | |
KOD DNA Polymerase(5U/μl) | 100μl |
10×KOD DNA Polymerase Buffer | 1ml |
说明书 | 1份 |
活性定义:
75C活性测定条件下,在30min 内摄入10nmoles 的dNTPs 使成为酸性不溶物时所需要酶的活性定义为1U。
反应体系:(50μl)
用无菌PCR级别的水补至终体积50 μl。实际操作中计算好需补加水的量后,建议先加水,然后按上述顺序添 加其它成分,最后添加KOD DNA Polymerase。充分混匀后,离心数秒使反应混合物沉到管底。然后将反应 管置于PCR仪中进行扩增。
注意:在冰浴上混合PCR各种成分,防止KOD反复冻融。
PCR条件的优化:
1. 质粒或者噬菌体模板:
模板量5-20ng,循环参数如下表:
2. 基因组DNA和cDNA模板:
基因组DNA模板量为50-100ng,1-2μl cDNA(起始转录用的RNA为500ng),循环参数如下表:
好评度