5×考马斯亮蓝G-250溶液(蛋白定量用)
中文名:5×考马斯亮蓝G-250溶液(蛋白定量用)
英文名:5×Coomassie brilliant blue G-250 Solution
CAS:N/A级别:N/A
分子量:N/A分子式:N/A
纯度:N/A储存条件:2-8℃
产品简介
产品简介：
Bradford蛋白浓度测定试剂盒(Bradford Protein Assay Kit)是根据最常用的两种蛋白浓度检测方法之一Bradford法研制而成，实现了蛋白浓度测定的快速，稳定和高灵敏度。
检测速度极快，10-20个样品只需不足10分钟即可完成。
灵敏度高，检测浓度下限达25ug/ml，最小检测蛋白量达到0.5ug，待测样品体积为1-20ul。
Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中β-巯基乙醇的浓度可高达1M，二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的去垢剂影响。需确保SDS低于0.05%，Triton X-100低于0.05%，Tween 20, 60, 80低于0.02%。含去垢剂的样品推荐使用生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒(SK1070)。
每个试剂盒可以检测250个样品。
使用说明：
1. 完全溶解蛋白标准品，取10ul稀释至250ul ，使终浓度为0.2mg/ml。蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见，也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。
2. 将标准品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20ul加到96孔板的标准品孔中，加标准品稀释液补足到20ul。
3. 加适当体积样品到96孔板的样品孔中，加标准品稀释液到20ul。
4. 各孔加入200ul 稀释后1×G-250染色液（1:4加水稀释，现配现用），室温放置3-5分钟。
5. 用酶标仪测定A595，或560-610nm之间的其它波长的吸光度。
6. 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
注意事项：
1. G-250染色液使用前请颠倒3-5次，混匀。
2. 蛋白标准请在全部溶解后先混匀，再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。
3. 将G-250染色液回复到室温再使用，有利于提高检测的灵敏度。
4. 需可检测560-610nm之间波长的酶标仪一台，最佳检测波长为595nm。并需96孔板。
5. 请穿实验服并戴一次性手套操作。
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