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考马斯亮蓝快速脱色液 JNC91300

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考马斯亮蓝快速脱色液

中文名:考马斯亮蓝快速脱色液

英文名:Coomassie brilliant blue R250 Protein destain Reagent

CAS:N/A级别:N/A

分子量:N/A分子式:N/A

纯度:N/A储存条件:RT

产品简介

常规染色脱色方法:

 1、电泳结束后,将凝胶置于培养皿内,加入染色液,确保覆盖凝胶。

 2、置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动,室温染色 1 小时或更长时间。

 3、倒出染色液(可重复使用 2-3 次)。加入脱色液,确保覆盖凝胶。

 4、置于摇床上缓慢摇动,室温脱色 4-24 小时。期间更换脱色液 2-4 次,至蓝色背景全部脱去,蛋白条带 染色达到预期效果。一般脱色 1-2 小时后蛋白条带即可出现。

 5、脱色后,凝胶保存在水中,用于拍照等。水中的凝胶会发生溶涨,如需避免溶涨,可以把胶保存在含 20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。

 快速染色脱色方法:

 1、电泳结束后,将凝胶置于适量考马斯亮蓝染色液中,微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾,立即停止加 热。胶浓度大于 10%的凝胶比较坚韧,煮沸时不易破损;胶浓度小于 10%的凝胶,尽量避免煮沸。   2、在染色液温度较高的情况下,随即在摇床上摇动 5-10 分钟。 

 3、倒出染色液(可重复使用 2-3 次)。加入适量脱色液,确保覆盖凝胶。

 4、微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾,立即停止加热。

 5、在脱色液温度较高的情况下,随即在摇床上摇动 5-10 分钟。随后通常能观察到比较清楚的蛋白条带。

 6、更换新鲜的脱色液,重复步骤 4 和步骤 5,直至蓝色背景全部脱去,蛋白条带达到预期染色效果。

 7、脱色后,凝胶保存在水中,用于拍照等。或置于含 20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。


 注意事项:

 1、常规方法耗时较长,但检测灵敏度更高,染色效果更加稳定。快速方法染色脱色速度快,通常检测灵 敏度略低,微波炉加热时会出现溶液暴沸导致凝胶碎裂的情况,需特别小心。另外微波炉加热加速染色液 和脱色液中的乙酸挥发,最好在通风橱中进行。

 2、染色时间取决于凝胶厚度和染色时温度。凝胶厚,温度低,染色时间长;凝胶薄,温度高,染色时间 短。凝胶和染色液的颜色一致,在染色液中看不清凝胶时,即为充分染色。染色时间延长效果也更好。   

 3、脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸,部分染料会吸附在吸水纸上,会加快脱色。脱色时间过长 会导致蛋白条带的颜色变浅。

 4、操作时请穿戴实验服和一次性手套。

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