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高分子量非变性电泳蛋白Marker(66-669 kD)JNC92003

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高分子量非变性电泳蛋白Marker(66-669 kD)

中文名:高分子量非变性电泳蛋白Marker(66-669 kD)

英文名:High MW non-denaturing protein Marker

CAS:N/A级别:N/A

分子量:N/A分子式:N/A

纯度:N/A储存条件:-20°C

产品简介

本产品是5种高纯蛋白质干粉混合物,总蛋白含量为250μg。具体蛋白含量如下:

蛋白名称

分子量(kD)

蛋白来源

蛋白含量(μg)

Thyroglobulin

669

porcine thyroid

76

Ferritin

440

equine spleen

50

Catalase

232

bovine liver

36

Lactate dehydrogenase

140

bovine heart

48

Albumin

66

bovine serum

40

操作说明:

1. 取100μl非变性蛋白上样缓冲液(1×)加入到蛋白干粉混合物中,彻底混匀融化后,-20℃贮存。

2. 常温融化后,彻底混匀,上样电泳。

注:上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。一般说来,0.75mm×5mm(厚度×宽度)的加样孔上样5 μl,其他规格梳子请适当调整上样量。

3. 电泳结束后,染色,观察结果。

注:使用银染时,由于灵敏度高于考马斯亮蓝染色方法,可以适当降低Marker上样量,一般稀释50倍。


注意:

1. 本蛋白Marker不适用于变性蛋白电泳(SDS-PAGE),因为在SDS存在下,含有多个亚单位的蛋白会不同程度解聚。

2. 在非变性条件下,蛋白的迁移与蛋白的电荷、蛋白形状以及蛋白分子量都有关。因此,在一种凝胶浓度下使用本Marker不能精确估计出目的蛋白的分子量。非变性电泳中,蛋白分子量的确定应该是在不同凝胶浓度下,确定出蛋白的Rf值,绘制出凝胶浓度对Rf的曲线从而判定蛋白的分子量。

QQ图片20210520135711.png

7.5% Laemmli Native gel

150V 70min DM2003 5μL


QQ图片20210520135735.png

           6% Laemmli Native PAGE 

          1×Tris-Glycine buffer 150V 70min DM2003 5μL


左1:高分子量非变性电泳蛋白质Marker(66-669 kD) 5 μl    

左2-5:待检样品 各5μl

电泳条件:

5-12% 聚丙烯酰胺梯度胶 厚1mm

Tris-甘氨酸不连续系统

150V 稳压电泳

考马斯亮蓝G250染色

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