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EDTA脱钙液 JNC91500

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EDTA脱钙液

中文名:EDTA脱钙液

英文名:EDTA decalcification solution

CAS:N/A级别:N/A

分子量:N/A分子式:N/A

纯度:N/A储存条件:RT

产品简介

产品说明:

 1. 在病理实验制作切片时,我们会经常碰到一些含钙组织,而且钙十分坚硬。由于组织中的钙和石蜡之间的密度不同,含钙的组织一般不能直接制作切片。骨组织含钙量最多。除了骨组织之外其它组织也可发生钙化,在组织中形成钙化区,所以需要经过脱钙过程。脱钙是制作骨组织切片的重要环节,尤其是要进行免疫组织化学染色的骨组织。

 2. 为达到骨组织既充分脱钙,又保护骨组织中的抗原不受破坏,需要对含钙的组织固定之后再进行脱钙。然后再行常规制片。

 3. EDTA 与羟基磷灰石结晶的外层钙结合,形成可溶性的非离子化合物,同时又促进晶体内层的结合钙向外转移。借助这种连续性的作用使羟基磷灰石晶体逐渐融解,pH 中性时可起螯合作用。其特点是脱钙时间长,对骨组织的损伤少,酶活性(碱性磷酸酶)和细胞抗原性保存较好,制作的切片可用于组织化学和免疫组化分析。

 4. 主要用途:用于骨组织、牙齿等脱钙。

使用说明:

 1. 骨组织脱钙时,取材不易过厚,一般大约 5mm。

 2. 组织固定后,用 PBS 清洗 3 次,每次 20min。

 3. 组织用蒸馏水洗清洗 3 次,每次 20min。

 4. 组织转移至 20~30 倍体积的 EDTA 脱钙液中,脱钙 10~30 天或更长时间。如果想加快脱钙速度,可以置于 37℃进行脱钙。如果必要,更换新的 EDTA 脱钙液继续脱钙,多数组织脱钙 2 周~3 个月即可,每周更换一次,直至终点。亦可采用微波快速脱钙法:微波炉设在 200W 左右的档位,每次加热 5min,依据组织厚度和密度重复 3~5min,中间间隔 3~5min。

 5. 用蒸馏水冲洗数次。

 6. 常规脱水、包埋。

注意事项:

 1.为使脱钙更为充分,每次最好更换新液,这既弃去脱掉的钙盐,增加脱钙强度,又起到降低脱钙的温度。

 2.脱钙时间以大头针能刺进骨密质为完成脱钙标准。

 3.脱钙温度不要太高,一般以室温(25℃)为宜,高温可加快脱钙速度,但可破坏组织中的核酸而影响染色效果。低温(4℃) 则会减慢脱钙速度。使组织在脱钙液中浸泡过久而引起损伤。

 4.为了提高 EDTA 的脱钙速度,骨组织取材尽量取薄。

 5.为了提高 EDTA 的脱钙速度,也可以采用微波脱钙。用微波炉辅助脱钙可以大大缩短脱钙时间,以微波间歇脱钙,每次辐射 1 分钟,每次辐射之间都将烧杯移至室温冷却 5 分钟,以保证每次的微波辐射脱钙液的温度不至于太高(70℃)。脱钙时脱钙液温度过高,易导致假阴性,背景色深等缺点。因此,在时间要求不紧迫的前提下,该方法也不应是首选。

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