RIPA Lysis Buffer (C05-01001)_实验室常用试剂_抗原和抗体_免疫组学

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RIPA Lysis Buffer

英文名称	RIPA Lysis Buffer
中文名称	RIPA裂解液(M)/RIPA裂解液(中)
别名	Radio Immunoprecipitation Assay Lysis Buffer; RIPA Lysis Buffer, Medium; RIPA Lysis Buffer (Medium); Medium; RIPA Lysis Buffer (M); Medium?RIPA?Lysis?Buffer; Mammalian Total Protein Extraction Kit; Protein Extraction Kit;

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产品介绍

简介
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。
RIPA裂解液的主要成分为主要成分为0mM Tris(pH 7.4)，150mM NaCl，1% NP-40，0.5% sodium deoJNCcholate，0.1% SDS等，另加有蛋白酶抑制剂Leupeptin、Aprotinin可以有效抑制蛋白降解。

使用说明：
根据使用量，取每1ml RIPA 加入10ul PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。混匀备用（PMSF现用现加）。
1、样品前处理：
a)对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
c)对于组织样品：把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。 (如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)。
用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
2、后处理：
将裂解后的样品10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

注意事项：
1、因SDS在低温易析出，如发现RIPA有沉淀，请先使其恢复室温，沉淀即可溶解。
2、裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3、裂解得到的蛋白样品，由于含有较高浓度的去垢剂干扰，不能用Bradford法测定蛋白浓度，可以选用本公司生产的BCA蛋白定量试剂盒（编号C05-02001）测定蛋白浓度。

商品评价