DAPI solution (Nuclear Labeling)
英文名称 | DAPI solution (Nuclear Labeling) |
中文名称 | DAPI染色液(即用型) |
别 名 | Nuclear Labeling Kit; DAPI solution(ready-to-use); DAPI Staining Solution; |
保存条件 | Store at 2-8℃ for one year. |
产品介绍 | 简介 DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚,能与DNA强力结合的荧光染料,常用与荧光显微镜及共聚焦观测。DAPI可以透过完整的细胞膜,用于活细胞和固定细胞的染色。分子式为C16H15N5?2HCl ,分子量为350.25。 DAPI可以穿透细胞膜与细胞核中的双链DNA结合而发挥标记的作用,可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞,荧光显微镜观察细胞标记的效率高(几乎为100 %) ,且对活细胞无毒副作用。DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。细胞经热激处理后用DAPI染色3分钟,在荧光显微镜下可以看到到细胞核的形态变化。 DAPI的最大激发波长为340nm,最大发射波长为488nm, DAPI和双链DNA结合后,最大激发波长为360nm,最大发射波长为460nm。 本DAPI染色液(DAPI Staining Solution)可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。 染色操作步骤: 1. 对于固定后的细胞或组织样品,适当洗涤去除固定剂。如果需要进行免疫荧光染色,可先进行免疫荧光染色,染完毕后再进行DAPI染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行DAPI染色。 2. 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量DAPI染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积3倍的色液,混匀。 3. 室温孵育5-10分钟。 4. 吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟,洗掉未结合的DAPI。 5. 用带有360nm激发波长,460nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。 注意事项: 1. 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。 2. 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液(产品编号:C02-04003)。 3. DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护,为了您的安全和健康,使用时戴一次性手套操作。 |
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