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TMB Single-Component Substrate solution (C04-03001)

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TMB Single-Component Substrate solution

英文名称TMB Single-Component Substrate solution
中文名称单组分超灵敏TMB显色试剂盒(含终止液)
别    名TMB Solution; Soluble TMB Substrate Solution; TMB kit; TMB One Solution (HRP-based ELISA);   
保存条件Store at 2-8℃ for one year.
产品介绍简介
目前酶免疫分析(EIA)技术,已被广泛应用于抗原,半抗原或抗体的定量或定性检测分析。辣根过氧化物酶(HRP)及其偶联物是酶联免疫分析技术中常用的一种酶,3,3’5,5’-四甲基联苯胺二盐酸(3,3′,5,5′tetramethylbenzidine,TMB)为过氧化物酶底物,常用作ELISA等免疫检测的显色剂。TMB被过氧化氢氧化时(由HRP催化)可形成蓝色产物,主要吸收峰在370nm和652nm。加入硫酸等酸性终止液后,变成黄色,最大吸收峰为450nm。TMB灵敏度很高,达到相同的检测灵敏度需要的量比ABTS少,但这也可能产生较高的背景,所以要求使用较少的蛋白或较低的抗体浓度。
单组分超灵敏TMB显色液无需混合,方便快捷,减少误差,灵敏度高。

试剂盒内容:
产品编号 C04-03001-50  C04-03001-100
TMB显色液A    50ml      100ml
TMB终止液B    50ml      100ml
说明书 一份

保存方法: 2-8 oC避光保存,一年有效。

显色步骤
1、加液:待样品孔中加完HRP结合物并孵育一定时间后,用适当洗涤液洗板3-5次,每孔加底物显色液A 100ul,根据个人实验需要,在室温(15-25℃)或37℃下避光温育10-30分钟或更长时间,直至显色至预期深浅。
2、终止:每孔加入100ul终止液B终止反应,孔中反应液由蓝色变为黄色。
3、终止反应后15分钟内在450nm处测定各孔溶液的吸光值。
4、对照:空白对照不加HRP标记的抗体/抗原和阴性对照结果应无色。阳性对照及加HRP标记的抗体/抗原产生深蓝色产物。
5、注意:如果出现高的反应背景或沉淀,表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀,可在终止后马上读数;或者进一步稀释一抗和/或HRP结合物。

安全性:
1、实验用品应该专一,避免交叉污染。
2、TMB对人体有刺激性,请注意适当防护。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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