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Calcein, AM (D-9114)

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Calcein, AM

英文名称Calcein, AM
中文名称钙黄绿素乙酰甲酯
别    名Cellstain Calcein-AM; 3',6'-Di(O-acetyl)-4',5'-bis[N,N-bis(carboJNCmethyl)aminomethyl]fluorescein, tetraacetoJNCmethyl ester;   
保存条件Store at -20℃, protect from light.
产品介绍Calcein, AM
  CAS#:148504-34-1
  中文名:3'-O-乙酰胺-2',7'-二(羧乙基)-4或5-羧基荧光素,二乙酰甲酯
  英文名:3',6'-Di(O-acetyl)-4',5'-bis[N,N-bis(carboJNCmethyl)aminomethyl]fluorescein, tetraacetoJNCmethyl ester
  别名:钙黄绿素乙酰甲酯
分子式:C46H46N2O23
  分子量:994.86
  性质:
  1. 外观:白色或浅黄色晶体
  2. 纯度:≥90%(HPLC)
  3. 产品描述:
  Calcein, AM是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成Calcein,从而被滞留在细胞内,发出强绿色荧光。与其它同类试剂(如BCECF, AM和CFDA)相比,Calcein, AM的细胞毒性很低。Calcein的激发和发射波长分别为490 nm和515 nm。
  Calcein, AM仅对活细胞染色。作为核染色染料的PI不能穿过活细胞的细胞膜,它穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核,并嵌入细胞的DNA双螺旋从而产生红色荧光(激发:535 nm,发射:617 nm),因此PI仅对死细胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激发,因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。用545 nm激发,仅可观察到死细胞。根据以上特点,Calcein, AM和PI经常被结合用来作为活细胞和死细胞的双重染色。
  由于不同细胞系的最佳染色条件不同,我们建议个别确定Calcein, AM和PI的合适浓度。
  4. 使用方法
  (1)用DMSO制备1 mM 的Calcein, AM溶液,并用PBS将其稀释制成1~50 μM的Calcein, AM溶液。注:如果Calcein, AM很难进入细胞,可以使用表面活性剂,如Pluronic F127。
  (2)将1/10细胞培养基体积的Calcein, AM溶液加入到细胞培养基中。注:也可以用1/10浓度的Calcein, AM溶液代替培养基。
  (3)在37℃培养细胞15~30分钟。
  (4)用PBS或适当的缓冲液洗涤细胞两次。
  (5)用490 nm激发波长,515 nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。

  储存条件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。
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