X-GAL
| 英文名称 | X-GAL |
| 中文名称 | 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷 |
| 别 名 | 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl beta-D-galactopyranoside; 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactopyranoside; 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactoside; |
| 保存条件 | Store at -20℃. |
| 产品介绍 | CAS号：7240-90-6 分子式：C14H15BrClNO6 分子量：408.63 MDL：MFCD00005666 级别：超纯 纯度：＞99% 外观/性状：白色至浅黄色粉末 溶解性：溶于DMSO，溶解度可达20mg/mL。也溶于DMF。 敏感性：对光敏感,易吸潮 用途：X-Gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的显色底物，在β-半乳糖苷酶的催化下会产生蓝色产物。常用于β-半乳糖苷酶的原位染色检测以及蓝白斑筛选。 配制储存液： 称取200mg X-Gal于15 mL 离心管，向其中加入10mL DMF，旋涡震荡使其充分溶解后，建议分装，-20℃避光保存，有效期可达6-12个月。 蓝白斑筛选： 1. X-Gal、IPTG 加入琼脂培养基溶液 1）高压灭菌已加琼脂的培养基，并冷却到50℃左右。 2）每毫升培养基内加入10 μL 20 mg/mL X-gal溶液、10 μL 0.1 M的IPTG（使其终浓度达到1 mM）； 3）加入适量抗生素； 4）混匀后按照平板大小倒入适量培养基，待培养基冷却至室温后，接种细菌于37℃过夜培养。 2. X-Gal、IPTG加到琼脂平板表面 1）于无菌超净工作台制备平板（如LB 琼脂板）； 2）取40 μL 100 mM IPTG和120 μL 20 mg/mL X-gal混合，均匀地涂布于准备好的平板上； 注：平板边缘较难充分涂布均匀，容易产生假阳性，因此，为了得到更好结果，建议后续操作中尽可能在平板中间挑取单克隆。 3）37℃孵育直至所有液体被吸收（30 min或更长）。接种细菌于37℃过夜培养。 |
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