10×BU溶液（pH 7.0，过滤除菌）
中文名:10×BU溶液（pH 7.0，过滤除菌）
英文名:10×BU buffer
CAS:N/A级别:N/A
分子量:N/A分子式:N/A
纯度:N/A储存条件:RT
产品简介
本试剂用于EGY48酵母杂交系统中，LacZ报告基因的检测；当有互作发生，lacz报告基因表达，生成β-半乳糖苷酶，将x-gal切割成半乳糖和深蓝色的底物5-溴-4氯靛蓝。
每个成分可以单独提供，或直接购买套装。
试剂准备：
1.筛选培养基配置：请将0.5L 的SD/-Trp/-Ura with Agar干粉，加入500mL的蒸馏水中，搅拌后于115℃灭菌 20min 后倒板；
注意：灭菌的培养基如有剩余，可置于超净台密封保存，再次使用时微波加热溶解后倒板即可。
2.显色培养基配置：
注意：半乳糖、棉子糖以及x-gal请在灭菌后，培养基冷却到55℃ 之后加入。半乳糖和棉子糖由于加入体积较大，请先置于55℃ 预热后加入，放置凝固过快。显色平板请尽快使用。3天内避光4℃保存的板子亦可以使用。
操作方法：（以EGY48-pLacZi酵母单杂交体系为例）
1.载体构建pLacZi-X & pB42AD-Y；
2.载体共转化EGY48酵母感受态细胞；
3.转化产物涂布SD/-Trp/-Ura with Agar 平板，28-30℃培养3-5天；
4.阳性克隆检测(菌落PCR)；
5.阳性菌落涂布SD-Ura-Trp/x-gal显色平板，28-30℃培养3-5天后观察显色反应。
注意：半乳糖、棉子糖以及x-gal请在灭菌后，培养基冷却到55℃ 之后加入。半乳糖和棉子糖由于加入体积较大，请先置于55℃ 预热后加入，放置凝固过快。显色平板请尽快使用。3天内避光4℃保存的板子亦可以使用。
操作方法：（以EGY48-pLacZi酵母单杂交体系为例）
1.载体构建pLacZi-X & pB42AD-Y；
2.载体共转化EGY48酵母感受态细胞；
3.转化产物涂布SD/-Trp/-Ura with Agar 平板，28-30℃培养3-5天；
4.阳性克隆检测(菌落PCR)；
5.阳性菌落涂布SD-Ura-Trp/x-gal显色平板，28-30℃培养3-5天后观察显色反应。
好评度