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X-α-gal JNC9922

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X-α-gal

中文名:X-α-gal

英文名:X-α-gal

CAS:107021-38-5级别:试剂级别

分子量:408.64分子式:C14H15BrCNO6

纯度:N/A储存条件:-20℃

产品简介

中文别名:5-溴-4-氯-3-吲哚基-alpha-D-吡喃半乳糖苷

英文别名:X-α-Gal, X-alpha-Gal, 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-α-D-galactoside

溶 解 性:溶于二甲基甲酰胺(DMF)、甲醇;1%甲醇溶液无色,清澈

关于X-α-gal:

    X-α-gal是酵母半乳糖苷酶(MEL1)的显色底物,MEL1是GAL4酵母双杂交系统的一个报告基因,该基因受GAL4调控。MEL1编码的分泌型的α-半乳糖苷酶可水解无色的X-α-gal,形成蓝色产物。MEL1基因激活后,X-α-gal检测阳性克隆表达的α-半乳糖苷酶,阳性克隆直接在含有X-α-gal的固体培养基上呈蓝色。因此无需裂解细胞,费时费力的检测β-半乳糖苷酶报告基因,只需通过蓝白颜色筛选,即可快速和简便地识别阳性克隆。

X-α-Gal的用途:

    1. 用于筛选含X-α-半乳糖苷酶基因的阳性酵母或细菌菌株。在固体培养基上直接检测酵母双杂交相互作用。

    2. 用于区分肠杆菌科内的不同菌种,以及区分双歧杆菌和乳酸菌;

    3. 在组织化学中用于酶活性的检测;

母液配置:

    X-α-GAL(20mg/ml): 25mg  X-α-GAL溶于1.25mL  DMF中(无需除菌或过滤除菌)。

使用方法:

    预混之后倒板:100mL固体培养基灭菌冷却到50℃后加入100-200μL X-α-GAL 母液

    在平板表面添加:4mg/mL X-α-Gal(in DMF),取200μL 涂布 15cm的平板/100μL涂布 10cm平板。

携带MEL1基因的酵母菌株:

    Y2HGold、Y190、AH190、Y187、PG69-2A

X-Gal与X-α-gal不同:

    X-Gal是E.coli β-半乳糖苷酶(LacZ)的反应底物,而X-α-gal是酵母α-半乳糖苷酶(MEL1)的反应底物。X-α-gal用作酵母双杂交系统中蓝白筛选的筛选标记。


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