Z buffer
中文名:Z buffer
英文名:Z buffer
CAS:N/A级别:N/A
分子量:N/A分子式:N/A
纯度:N/A储存条件:2-8℃
产品简介
操作方法：
1．为了得到最好的结果，用新鲜的克隆（一般30℃培养2-4天），菌落直径1-3mm。
2．配制Z buffer/X-gal 溶液
3．预先将滤纸放在盛有2.5-5.0ml的Z buffer/X-gal 溶液的培养皿中。
4．用镊子夹取一张干净、干燥的滤纸放在长有菌落的平板上，轻轻用镊子摩擦将滤，帮 助菌落附着在滤纸上。
5．透过滤纸，在三个不同的方位上穿孔（不对称的方位），此方法用于在培养基上确定 滤纸的方向。
6．当滤纸均匀湿润后，用镊子小心将滤纸从培养基上取下，转移到液氮中，浸没在液氮 中10妙。
7．取出液氮中冷冻过的滤纸，室温下融化。
8．小心将滤纸正面朝上，放在第三步预处理的滤纸上，避免在两层滤纸中间产生气泡。
9．将带有两层滤纸的培养皿放于30℃或室温下，定期检查蓝色菌落的出现情况。一般8 小时之内变蓝的可初步定位阳性克隆。
10.在平板上找到与蓝色菌落相对应的菌落，挑相应的蓝色菌落到新的培养基平板 上。
方法改进：
先在一个培养皿中铺一张普通灭菌滤纸，再加2.5-5.0ml Z buffer/X-gal溶液将滤纸润湿；然后将显色滤纸（Whatman 5# 滤纸或Grade 410滤纸）剪成长方形，放在培养皿中，加少量灭菌水润湿，用牙签挑取菌落轻轻在滤纸上划线，直接液氮冷冻10妙钟，取出室温融化，放在预先准备好的滤纸上，避免在两层滤纸间产生气泡。做好标记后， 放在30℃或室温下，定期检查蓝色菌落的出现情况。一般8小时之内变蓝的可初步定位阳性克隆。
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