非变性酵母蛋白提取试剂盒
中文名:非变性酵母蛋白提取试剂盒
英文名:非变性酵母蛋白提取试剂盒
CAS:N/A级别:N/A
分子量:N/A分子式:N/A
纯度:N/A储存条件:RT
产品简介
储存条件：RT，未开封有效期24个月。
产品内容：
产品说明：
本产品通过使用玻璃珠震荡法破壁结合化学法破碎酵母细胞壁，适用于多种酵母菌的培养物（包括菌液或平板菌落）。提取液不含蛋白变性剂，提取过程无需高温处理，提取的总蛋白可用于蛋白活性检测相关实验。该试剂盒提取的蛋白可以用Bradford定量试剂盒（SK1060）或BCA定量试剂盒（SK1070）进行蛋白定量。
准备步骤：
将洗涤液和提取液置于冰上预冷。
操作步骤：
1.5,000 rmp，4 ℃离心5 min，收集酵母菌液细胞沉淀（酵母菌液OD值0.5-2.0）。
2.加入1 mL预冷的洗涤液，震荡混匀。5,000 rmp，4 ℃离心5 min沉淀酵母细胞，弃上清。
3.用100 μL预冷提取液悬浮酵母细胞，并快速转移到1.5 mL塑料离心管中。
4.加入0.5 g的玻璃珠，在旋涡震荡器上剧烈震荡混合5-10 min（间歇冰浴冷却）。
5.用移液器或者巴斯德吸管回收提取液。
6.再加入100 μL预冷提取液到剩余的玻璃珠中，稍加震荡，再次回收提取液。
7.合并两次所得提取液即为酵母总蛋白样品。
8.（可选步骤）12,000 rmp，4 ℃离心15 min，上清含可溶性蛋白质，沉淀含不溶性蛋白质。
9.提取总蛋白样品直接用于后续活性检测实验或-80 ℃保存备用。
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