Raw264.7-LUC-GFP-PURO 细胞
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细胞名称 | Raw264.7-LUC-GFP-Puro双标记的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 |
货 号 | JNC90326LG |
组织来源 | 成年雄性BALB/c小鼠，Abelson鼠白血病病毒诱导的肿瘤，腹水 |
细胞形态 | 单核细胞/巨噬细胞 |
生长方式 | 贴壁生长 |
描 述 | 该细胞株建自Abelson小鼠白血病病毒诱发的肿瘤组织，是科研上最常用的炎症细胞模型之一。该细胞易于增殖，高效DNA转染力，对RNA干扰敏感，常用作转染宿主细胞和复制小鼠诺如病毒。该细胞表面sIg-、Ia-、Thy-1.2抗原阴性。据报道，该细胞建系后已不分泌且检测不到病毒颗粒，XC斑点形成实验阴性。可以抗体依赖性地分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞，LPS或PPD处理2天后可诱导分解红血球但对肿瘤靶细胞无作用。经检测鼠痘病毒阴性。 |
构建信息 | Raw264.7-LUC-GFP-Puro细胞为慢病毒感染Raw264.7细胞得到的稳定表达萤火虫荧光素酶和GFP的细胞系。 |
培养条件 | DMEM高糖（含丙酮酸钠），10%FBS；空气95%，二氧化碳5%；37℃培养 |
换液频率 | 2-3天 |
传代周期 | 3-5天 |
传代比例 | 1:6-1:10 |
冻存液配方 | 70%基础培养基，20%FBS，10% DMSO |
安全性 | BSL-2 |
供应限制 | 仅供研究之用。 |
细胞操作详细步骤
--悬浮细胞
1.细胞复苏
1.1准备一个T25的细胞培养瓶并做好标记，预热好的细胞完全培养基，一支15ml离心管，离心管中加入4-5ml细胞完全培养基。
1.2取出细胞冻存管，在37度水浴中快速解冻，将管子擦干消毒后迅速拿回生物安全柜。
1.3将细胞悬液转移到加有培养基的离心管中，1000转离心5分钟。
1.4倒掉上清，加入培养基轻轻重悬细胞亦可先将细胞团弹散后加入培养基混匀。
1.5将重悬好的细胞转移到T25细胞培养瓶，补充培养基到5ml左右，十字摇晃，将细胞铺匀后放入培养箱培养。
2.细胞传代
第一种方法：
2.1细胞密度达到2×106细胞/ml时，1000转离心5分钟收集细胞，弃上清，加入新鲜培养基，使细胞密度在1-3×105细胞/ml.
第二种方法：
2.2细胞密度达到2×106细胞/ml时，将培养瓶中的细胞悬液分装到新的培养瓶，并补充新鲜培养基，使细胞密度在1-3×105细胞/ml.
3.细胞冻存
将培养瓶中的细胞悬液转移到离心管中，1000转离心5分钟收集细胞，弃上清，加入冻存液，重悬细胞，并分装到冻存管，冻存密度1-2×106细胞/ml。将冻存管放入程序降温盒，并放到-80℃冰箱，过夜后将冻存管转移到液氮保存。
4.注意事项
4.1建议收到细胞后先用我们配套的培养基和血清。收到活细胞的客户培养瓶中的培养基可回收使用，保存在4度可使用一周。
4.2不同实验室操作上会有些许差异，为了避免细胞不适应，请先按照说明书推荐的方法和操作步骤培养，待细胞冻存后可根据自己的习惯操作看细胞是否能够适应。
4.3建议收到细胞后，前几代及时冻存一些细胞，并最好是可以多冻存几个批次。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
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